分光光度计，又称光谱仪(spectrometer)，是将因素重大的光，剖析为光谱线的科学仪器。丈量规模一ban包罗波长规模为380~780 nm的可见光区和波长规模为200～380 nm的紫外光区。差异的光源都有其特有的发射光谱，因此可接纳差异的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱：钨灯光源所发出的380～780nm波长的光谱光通过三棱久魅折射后，可获得由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的一连色谱；gai色谱可作为可见光分光光度计的光源。

仪器组成

  分光光度计已经成为现代分子生物实验室通例仪器。常用于核酸，卵白定量以及细菌生长浓度的定量。

  仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处置赏罚器和显示与存储系统组成。

原理：

  分光光度计接纳一个可以发生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而发生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部门光线被吸收，盘算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

  单色光辐射穿过被测物质溶液时，被gai物质吸收的量与gai物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 ：A 为吸光度；

I0为入射的单色光强度；

I 为透射的单色光强度；

T 为物质的透射率；

k 为摩尔吸收系数；

L 为被剖析物质的光程，即比色皿的边长；

c 为物质的浓度；

  物质对光的选择性吸收波长，以及响应的吸收系数是gai物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将gai供试品配成溶液，测定其吸收度，即可由上式盘算出供试品中gai物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，许多物质本shen并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经由处置赏罚使其显色后再测定，故又称比色剖析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测准时应用尺度品或对照品同时操作。

操作要领：

1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。

2.将迅速度开关调至“1”档（若零点调治器调不到“0”时，需选用较高等。）

3.凭证所需波长转动波长选择钮。

4.将空缺液及测定液划分倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空缺管瞄准光路。

5.在暗箱盖开启状态下调治零点调治器，使读数盘指针指向t=0处。

6.盖上暗箱盖，调治“100”调治器，使空缺管的t=100，指针稳固后逐步拉出样品滑竿，划分读出测定管的光密度值，并纪录。

7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。

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